產品描述

貨號：520045  

英文名：microTUBE AFA Fiber Pre-Slit Snap-Cap 6x16mm (25)  

中文名：微管AFA纖維預切口卡扣蓋6x16mm（25支裝）  

品牌：Covaris  

規格：25個/包  

適用場景：DNA/RNA片段化、染色質剪切（ChIP實驗）、低起始量樣本處理（如單細胞或微量組織）。  

產品特點

1. 精準片段化  

  • 基于AFA技術，通過高頻短波長（1 MHz）聲波聚焦，實現DNA/RNA片段化長度可控，重復性高（CV<5%）。  

  • 支持非接觸式處理，避免交叉污染，減少樣本損失。  

2. 等溫處理  

  • 水浴恒溫系統（默認20°C）確保實驗過程中溫度波動≤±2°C，保護熱敏感樣本的完整性。  

3. 高兼容性  

  • 適配微量樣本（13–300 μl），尤其適用于FFPE組織、單細胞或低起始量的染色質剪切。  

  • 兼容Covaris SonoLab軟件，支持自定義參數設置。  

4. 耐用性與安全性  

  • 卡扣蓋設計防止液體泄漏，透明管體便于實時觀察。  

  • 耐化學腐蝕，可反復使用。  

儲存條件

• 環境：常溫（15–25°C），避免高溫（>30°C）或低溫（<5°C）。  

• 濕度：相對濕度≤60%，遠離陽光直射及潮濕環境。  

• 保質期：未開封狀態下保質期1年，開封后建議6個月內使用完畢。  

工作原理

1. AFA技術核心  

  • 通過壓電陶瓷換能器將電能轉化為高頻聲波（1 MHz），聚焦于樣本區域，產生瞬時高壓（>50 MPa）導致核酸鏈斷裂。  

  • 能量密度和占空比可調節，控制片段化程度。例如：  

    ? DNA剪切：典型參數為200 W功率、20%占空比、200次循環/爆發，處理時間30秒。  

    ? 染色質剪切：低功率（55 W）、低占空比（5%），避免組蛋白修飾酶失活。  

2. 樣本處理流程  

  • 離心預處理：樣本需離心（3000×g，30秒）去除氣泡，確保均勻分布。  

  • 水浴恒溫：將微管置于水浴槽中，通過循環水維持溫度穩定。  

  • 超聲處理：儀器自動控制聲波聚焦位置與時間，生成目標片段。  

解決實驗中的關鍵問題

1. 片段化不均  

  • 傳統超聲或酶切法易導致片段大小分布寬泛，AFA技術通過精準能量控制實現單分散性片段。  

2. 交叉污染風險  

  • 非接觸式處理避免樣本間污染，尤其適用于病原體檢測或臨床樣本分析。  

3. 熱損傷  

  • 等溫條件保護DNA/RNA二級結構及蛋白質表位，適用于ChIP-seq等下游應用。  

4. 低起始量樣本處理  

  • 支持微量樣本的片段化，減少因樣本量不足導致的實驗失敗。  

使用方法

步驟1：樣本準備  

• 樣本類型：基因組DNA、FFPE提取的DNA、染色質、RNA等。  

• 體積要求：13–300 μl（推薦130–150 μl），濃度≥50 ng/μl。  

步驟2：安裝微管  

1. 將microTUBE插入Holder XTU的卡槽中。  

2. 確保管體與Holder緊密貼合，避免超聲過程中移位。  

步驟3：設置參數  

• 軟件設置：通過SonoLab軟件選擇預設程序，或自定義參數：  

 • 功率：55–200 W（根據樣本類型調整）。  

 • 占空比：5–20%。  

 • 循環次數：100–500次。  

• 水浴溫度：默認20°C，可手動調節至15–25°C。  

步驟4：運行程序  

• 啟動超聲處理，儀器自動記錄能量輸出與時間。  

• 處理完成后，取出微管并離心（3000×g，30秒）去除殘留液滴。  

步驟5：質量檢測  

• 使用Agilent 2100 Bioanalyzer或High Sensitivity DNA Kit驗證片段分布。  

常見問題與解決方案

問題1：片段大小偏離預期  

• 原因：參數設置錯誤、樣本純度不足。  

• 解決：校準儀器能量輸出，純化樣本。  

問題2：樣本污染  

• 原因：Holder未清潔或卡扣蓋密封不嚴。  

• 解決：每次實驗后使用70%乙醇擦拭Holder，更換新卡扣蓋。  

問題3：微管破裂  

• 原因：過度離心或機械撞擊。  

• 解決：避免高速離心（>5000×g），輕拿輕放。  

問題4：儀器報錯“水位不足"  

• 原因：水浴槽水位過低或傳感器堵塞。  

• 解決：補充水至MAX線，清潔水位探頭。  

關鍵詞：Covaris耗材、核酸打斷管、AFA技術、ChIP實驗、微量樣本處理、DNA片段化、RNA剪切、染色質免疫沉淀、超聲破碎儀、FFPE樣本處理、低起始量實驗、精準片段化、非接觸式超聲、實驗室耗材、基因組DNA提取、生物醫學研究、科研儀器配件、Covaris M220、ME220系統、高通量測序前處理  

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